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小鼠單核巨噬細胞RAW264.7的匯合度實時分析實驗

發布時間:2026-06-15

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RAW264.7是科研領域家喻戶曉的小鼠單核巨噬細胞系,憑借性狀穩定、可塑性強、實驗門檻低的優勢,成為免疫學、炎癥生物學、骨代謝與藥物毒理研究的標桿細胞模型。相較于分離難度大、存活條件苛刻、無法長期傳代的原代巨噬細胞,RAW264.7具備無限增殖的能力,且細胞表型穩定、性狀穩定。


01核心科研價值

炎癥相關研究中,利用LPS刺激即可快速構建穩定的體外炎癥模型,重復性高、成本低廉,適合大批量抗炎藥物篩選與通路機制驗證。


在腫瘤微環境研究中,該細胞可模擬腫瘤相關巨噬細胞的浸潤與調控作用,助力腫瘤免疫機制探索。

同時,它也是納米材料、生物制劑、天然產物的毒性與免疫安全性評價的核心載體,能夠精準反饋外源物質對機體免疫平衡的影響


02標準化培養體系

1. 培養基配制:基礎配方:89% 高糖DMEM + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 雙抗。

2. 培養環境溫度與氣體:37℃,5% CO?,相對濕度95%。


03實操攻略與技術要點

1. 復蘇速融:37℃水浴1-2分鐘迅速解凍,注意震蕩以加速溶解。去DMSO:轉移至離心管,1000 rpm離心5分鐘,棄上清以徹底去除DMSO。

接種:使用新鮮培養基重懸并接種,接種后24小時內嚴禁晃動培養箱,確保細胞充分貼壁。


2. 傳代該細胞最大的特點是半懸浮半貼壁狀態,和普通貼壁細胞不同,嚴禁胰酶消化。

常規傳代無需胰酶處理,借助培養基溫和吹打即可脫落,一旦消化過度,會造成細胞破損、活性驟降,影響后續實驗。同時該細胞對培養密度異常敏感,匯合度一旦超過85%,細胞會堆疊聚集、自發活化,產生本底炎癥升高的問題,嚴重干擾實驗數據,因此必須嚴控傳代頻率,始終保持RAW264.7細胞疏密均勻的生長狀態。


04MCS31下的RAW264.7

明美活細胞成像儀MCS31實現了對活細胞培養以及研究過程中的可視化與量化追蹤。

對48h長期觀察下的RAW264.7進行掃描觀察以及匯合度結果分析:


關于明美MCS31活細胞成像儀

實現細胞增殖、細胞遷移、熒光轉染等細胞實驗的全過程監測與實時分析,適配于細胞培養、共培養、類器官構建與觀察、藥物篩選等多種研究場景,讓動態實驗數據化、結果可視化,為細胞生物學、藥理學等領域的研究提供高效可靠的成像解決方案。

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